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EMSA
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商品说明
服务介绍 凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析。目前已用于研究DNA结合蛋白和特定的DNA序列的相互作用,是转录因子研究的经典方法。 验证型EMSA ⽤于验证探针是否含有可与蛋⽩质结合的位点。将结合位点突变,以突变探针为对照,野⽣型探针出现迁移条带,⽽突变探针未出现迁移条带,则说明该探针含有可与蛋⽩质结合的位点。 竞争型EMSA 探针序列不变,不含修饰基团的探针称为冷探针。冷探针与标记探针竞争性地与蛋⽩结合,冷探针不显影出迁移条带。以冷探针为对照,标记探针出现迁移条带,⽽冷探针迁移条带减弱或消失,则排除了假阳性⼲扰,增加实验结果准确性。 超迁移EMSA 使⽤⽬标蛋⽩的特异性抗体,蛋⽩-探针复合物被抗体识别并结合,该三聚复合物在凝胶电泳中,迁移速率再次增⼤,出现在蛋⽩-探针复合物的上⽅的超迁移条带,验证了探针与⽬的蛋⽩的特异性结合。 服务优势 直接测定蛋白质与核酸的相互作用,提供定性和定量信息。 可用于研究多种类型的相互作用,如特异性结合、非特异性结合、序列特异性等。 技术简单,实验操作相对容易。 可以使用不同的标记方法和检测技术进行适应不同实验需求。 服务流程 接收订单及样品—实验设计—合成探针—EMSA电泳凝胶配置—EMSA反应—电泳检测—显色反应—结果交付 送样要求 需提取核蛋白的细胞>10^7,动物组织不少于400 mg,植物组织不少于2 g,建议客户在我司表达重组蛋白; 探针序列; 如使用结合蛋白特异性抗体,抗体50 μL以上,浓度大于0.5 mg/mL。 特别说明 EMSA亦可⽤于研究RNA结合蛋⽩和其相关RNA序列的相互作⽤ 如需要做超迁移,需提供IP级别的抗体 EMSA与酵⺟单杂交,可共同验证同⼀个问题 |