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动物-病毒尾静脉注射尾静脉注射
当感染全身神经系统时常用尾静脉注射,其具体操作步骤如下: 1. 小鼠固定 a.首先提取小鼠尾巴,将其放在鼠笼盖或手臂上,并进行适当安抚; b.然后将小鼠装入固定器(可用50ml离心管改造)中,盖紧盖子,并使其尾巴朝外露出; c.用酒精棉球擦拭小鼠尾巴,使其血管扩张(也可用热水、加热器等)。 2. 病毒注射 a.用生理盐水或PBS将病毒稀释至合适滴度(控制病毒注射体积在100-200 μl); b.用1ml注射器吸取100~200 μl病毒; c.将小鼠尾巴拉直使其红色静脉清晰可见,在距尾尖1/3处进针,缓慢注入病毒后拔出,用棉球按压注射点1min左右以止血。
3. 动物恢复 将小鼠从固定器上取下,放回原饲养笼中。
注意事项: 1. 脑立体定位注射位点精确性要求高,坐标需精确,在正式病毒注射实验前可注射蓝墨水等染料确认注射坐标是否正确; 2. 调平的质量保证了脑区注射点的准确性,确保在开始注射前调整前囟和后囟点位于同一水平面,两点连线左右相同距离的点也处在同一水平面; 3. 操作过程中动作要轻柔,不要盲目用力或暴力操作,避免造成脑损伤、注射器针头折弯等影响实验; 4. 脊髓感染一般每节两个位点即可,若发现感染范围不够可适当增多注射点; 5. 鞘内注射时,异氟烷麻醉起效快苏醒快,但要控制好浓度,过量容易致使小鼠死亡; 6. 鞘内注射时注意控制病毒注射体积,避免鞘内压力增加而造成损伤; 7. 眼部注射时对注射病毒的眼睛做好局部抗菌处理,且下针时注意避开血管; 8. 尾静脉注射在相同剂量的情况下建议注射体积尽量大些,一般每只小鼠注射200ul左右。
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