1.血清型 8 92.启动子选择广谱型启动子CMV；AAT(Shen,et al.1989. Hafenrichter,et al.1994Xia,et al.2020)、TBG（Yan,et al.2012Wang,et al.2011）3.注射方式定点注射-肝脏直接递送，转导效率高，但具有高侵入性、操作复杂、有凝血缺陷的动物具有术后并发症风险。外周载体递送，虽然侵入性小，操作简单，但病毒用量较大肝门静脉注射1）. 肝门静脉注射（1）通过腹腔注射麻醉剂将成年小鼠麻醉，对小鼠腹部局部区域做去毛及消毒处理；（2）在距剑突软骨下方2-3mm处，做一个2-3cm的中线切口。（3）暴露门静脉，使用30G针头在1min内均匀缓慢注

尾静脉注射当感染全身神经系统时常用尾静脉注射，其具体操作步骤如下：1. 小鼠固定a.首先提取小鼠尾巴，将其放在鼠笼盖或手臂上，并进行适当安抚；b.然后将小鼠装入固定器（可用50ml离心管改造）中，盖紧盖子，并使其尾巴朝外露出；c.用酒精棉球擦拭小鼠尾巴，使其血管扩张（也可用热水、加热器等）。2. 病毒注射a.用生理盐水或PBS将病毒稀释至合适滴度（控制病毒注射体积在100-200 μl）；b.用1ml注射器吸取100~200 μl病毒；c.将小鼠尾巴拉直使其红色静脉清晰可见，在距尾尖1/3处进针，缓慢注入病毒后拔出，用棉球按压注射点1min左右以止

降解内源性蛋白质等生物大分子和受损细胞器实现氨基酸和单糖的再循环维持细胞内环境稳态和生存 溶酶体（Lysosome）二，根据底物进入溶酶体途径的不同，可将自噬分为①大自噬（Macroautophagy），即通常说的自噬（Autophagy）：待降解物首先进入自噬体，然后与溶酶体融合并降解其内容物；②小自噬（Microautophagy）：溶酶体直接吞噬 待降解的一种方式；③分子伴侣介导的自噬（Chaperone-mediated autophagy， CMA）：一些分子伴侣能帮助未折叠蛋白转位进入溶酶体，在清除蛋白质时有选择性，而前两者无明显的选择性。例：线粒体自噬自噬发生

一、PCSK9 简介前蛋白转化酶枯草溶菌素 9 (proprotein convertase subtilisin kexin type 9, PCSK9)是一种常染色体显性高胆固醇血症相关基因, 其编码蛋白可以与肝细胞表面低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor, LDLR) 结合, 形成复合物并靶向转运到溶酶体内进行降解, 从而阻断 LDLR 在细胞膜表面的循环途径, 抑制低密度脂蛋白胆固醇 (low densitylipoproteincholesterol, LDL-C)的代谢清除,血浆中 LDL-C 升高, 最终导致动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS) 的发生。PCSK9 的功能获得性突变 PCSK9 DY 可以诱发高胆固醇血症。研

一、siRNA 相关产品二、siRNA产品运输与保存◆产品经低温真空抽干以后以粉状态在常温下运输，收到产品后请置于-20*C~-80C保存，干粉可以稳定保存一年，短期内若无实验计划，建议干粉保存。◆RNA 以膜或干粉状态附着于管壁，开盖之前务必请瞬时离心，使用前加 RNase Free Water 溶解成20uM 的储存液，分装后置于-20*C~-80*C保存，以利于后续实验，且避反复冻融（最多5次），溶解后siRNA在-80*C可保存6个月。◆siRNA 容易降解，所有操作需严格遵循RNA操作规则，实验结束后剩余储存液请及时保存于-20*C~-80*C。三、使用前须知化学合成siRNA一